分光光度法是基于物质对特定波长光的吸收特性进行定量分析的经典方法，其核心步骤——显色反应对温度变化极为敏感。温度过高可能导致显色剂分解或反应过度，温度过低则会使反应速率减缓、显色不完全，二者均会造成吸光度测定偏差，影响最终分析结果。因此，选择一款温度控制精度高、稳定性强的温控设备，是保障分光光度法实验成功的关键。

博清生物科技（南京）有限公司作为专注于实验室设备研发的企业，其生产的电热恒温水浴锅采用微电脑智能温控系统，具备温度设定范围宽（室温-100℃）、控温精度高、加热均匀等特点。

一、实验部分

（一）实验仪器与试剂

1、主要仪器：博清生物电热恒温水浴锅；紫外可见分光光度计；电子分析天平；移液管；容量瓶。

2、主要试剂：邻二氮菲；硫酸亚铁铵；盐酸；醋酸-醋酸钠缓冲溶液（pH=5.0）；实验用水为超纯水。

（二）实验原理

本实验以邻二氮菲分光光度法测定铁离子含量为例，验证博清生物电热恒温水浴锅的应用效果。在pH=5.0的醋酸-醋酸钠缓冲溶液中，Fe²⁺与邻二氮菲发生显色反应，生成稳定的橙红色络合物[Fe(phen)₃]²⁺，该络合物在510nm波长处具有最大吸光度。根据朗伯-比尔定律，在一定浓度范围内，络合物的吸光度与Fe²⁺浓度呈线性关系，通过测定吸光度即可计算出样品中铁离子的含量。

该显色反应的最佳温度为25℃，温度波动需控制在±0.5℃以内，否则会导致络合物生成量变化，影响吸光度测定结果。因此，实验中需通过博清生物电热恒温水浴锅精准控制显色反应温度，确保反应条件的一致性。

（三）实验方法

1、标准溶液配制

准确称取0.1961g硫酸亚铁铵，用1mol/L盐酸溶解后，转移至100mL容量瓶中，用超纯水定容至刻度，得到浓度为0.005mol/L的Fe²⁺标准储备液。

分别移取0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL Fe²⁺标准储备液至5个50mL容量瓶中，各加入5mL醋酸-醋酸钠缓冲溶液（pH=5.0）和2mL 0.1%邻二氮菲溶液，摇匀后备用。

2、显色反应温度控制

将上述5个容量瓶分别放入博清生物电热恒温水浴锅中，设定水浴温度为25℃，待水浴温度稳定后（显示屏显示温度波动≤±0.1℃），保持恒温反应15min，确保显色反应充分进行。

同时，设置对照组实验：采用传统普通水浴锅（控温精度±1℃），同样设定温度为25℃，对相同浓度的标准溶液进行显色反应，反应时间相同。

3、吸光度测定

显色反应结束后，将容量瓶取出，用超纯水定容至刻度，摇匀。以空白溶液（不加Fe²⁺标准液，其余试剂相同）为参比，在510nm波长处，用分光光度计分别测定两组实验（博清生物水浴锅组、传统水浴锅组）中各标准溶液的吸光度。

每组实验平行测定3次，计算平均吸光度，并绘制标准曲线，计算线性回归方程及相关系数（R²）。

4、温度稳定性与重复性验证

为进一步验证博清生物电热恒温水浴锅的温度稳定性，在25℃、30℃、35℃三个温度点，分别持续监测1h，记录温度变化数据，计算温度波动范围。

选取浓度为0.00002mol/L的Fe²⁺标准溶液，在博清生物水浴锅中进行6次平行显色反应实验，测定吸光度并计算相对标准偏差（RSD），验证实验重复性。

二、结果与讨论

（一）温度控制精度分析

通过对博清生物电热恒温水浴锅在25℃、30℃、35℃三个温度点的1h持续监测，博清生物电热恒温水浴锅在不同设定温度下，温度波动范围均控制在±0.1℃以内，完全满足分光光度法显色反应对温度精度的要求（±0.5℃）。相比之下，传统普通水浴锅在相同温度点的温度波动范围为±1℃，无法保证显色反应条件的一致性，易导致实验误差。

（二）标准曲线与线性关系

两组实验（博清生物水浴锅组、传统水浴锅组）的标准曲线参数，博清生物水浴锅组的标准曲线相关系数R²=0.9998，接近1，表明Fe²⁺浓度与吸光度的线性关系极佳；而传统水浴锅组的R²=0.9975，线性关系相对较差。这是因为博清生物水浴锅的精准温控确保了显色反应充分且一致，络合物生成量稳定，从而使吸光度与浓度的线性相关性更高；而传统水浴锅的温度波动导致部分样品显色不完全，吸光度测定值出现偏差，线性关系下降。

（三）实验重复性验证

对浓度为0.00002mol/L的Fe²⁺标准溶液进行6次平行实验，博清生物水浴锅组的吸光度测定结果，6次平行实验的吸光度平均值为0.2295，相对标准偏差RSD=0.48%，远低于分析化学实验中对重复性的要求（RSD≤5%）。这一结果表明，在博清生物电热恒温水浴锅的精准温控下，显色反应的重复性极佳，能够有效避免因温度波动导致的实验数据离散性，为科研实验提供稳定可靠的结果。

（四）误差分析与优势总结

对比两组实验结果，传统水浴锅组因温度波动较大，导致显色反应不完全或过度，使吸光度测定值的相对误差最大可达5.2%；而博清生物水浴锅组的相对误差仅为0.8%，显著降低了实验误差。

博清生物电热恒温水浴锅的优势主要体现在以下三方面：

1、高精度温控：±0.1℃的控温精度能够精准匹配显色反应的最佳温度条件，确保反应充分且一致；

2、稳定的温度环境：采用循环加热方式，水浴槽内温度分布均匀，无局部温差，避免了因温度不均导致的样品间差异；

3、智能操作与监控：配备高清显示屏，实时显示温度数据，支持温度设定与校准，操作便捷，便于实验过程中的温度监控与记录。

本研究以邻二氮菲分光光度法测定铁离子含量为实验模型，系统探究了博清生物科技（南京）有限公司研发的电热恒温水浴锅在分光光度法显色反应中的应用效果。实验结果表明：

该水浴锅可实现±0.1℃的温度控制精度，温度稳定性优异，能够为显色反应提供恒定的温度环境；

在其温控条件下，显色反应充分且一致，标准曲线的相关系数高达0.9998，线性关系良好；

实验重复性佳，吸光度测定结果的相对标准偏差仅为0.48%，显著降低了实验误差，提高了分析结果的准确性。

博清生物科技（南京）有限公司研发的电热恒温水浴锅能够满足分析化学实验中分光光度法显色反应对温度控制的严格要求，为科研人员提供稳定、可靠的实验条件，对提升分光光度法分析结果的可信度与科研数据的质量具有重要意义，值得在分析化学科研领域广泛推广应用。